Разное

Кот пилот: Кот-пилот из Ставропольского края покоряет интернет

Содержание

Кот-пилот из Ставропольского края покоряет интернет

Алена БЕЛЯЕВА

3 июня 2018 19:10

Необычный питомец поселился в аэропорту Минвод

Басик ждет разрешения подняться на борт. Фото: интернет-канал aviator

В аэропорту Минеральных Вод Ставропольского края поселился кот по имени Басик. Серый в полоску пушистик давно стал всеобщим любимцем, а недавно его снимки оказались в интернете, и теперь за жизнью хвостатого следит вся страна.

Басик подкармливает других котов. Фото: соцсети

– Если верить в реинкарнацию, то это она и есть. Животным Басика не назвать. Он все понимает, знает все процедуры на самолёте. Кот знает, когда можно зайти, а когда ему пора на землю. Когда даешь ему кушать, то он не ест, а берет то, что ему поместится в пасть, и несет добычу другим котам, тем кто очень боится самолетов, и угощает их. А потом уже возвращается обратно на борт и кушает сам, – рассказал “Комсомольской правде на Северном Кавказе” пилот Сергей Самойлов.

Кот никогда не откажется от игр. Фото: интернет-канал aviator

По словам сторожилов, Басик появился на взлетной полосе несколько лет назад и за это время стал местной достопримечательностью. Кот живет на первой стоянке, а все свое свободное время встречает и провожает самолеты. Иногда его пускают на борт, когда там нет пассажиров. Он тут же располагается в удобных креслах и ждет, когда ему принесут чего-нибудь вкусненького. Добрые стюардессы постоянно подкармливают Басика, и на местном пайке он довольно быстро набрал лишние килограммы.

Пилоты считают кота уникальным животным. Фото: соцсети

– Очень интересно наблюдать как он сидит такой важный у ног техников и представителя авиакомпании возле трапа. Сидит и ждет. Выходят все пассажиры, он их провожает. Как он понимает? Не знаю. И потом только поднимается на борт. А когда звучит команда: “Посадка пассажиров!”, его лапы уже бегут по трапу вниз. Но все же мужик есть мужик. Любит он больше бортпроводниц, а ребятам в руки не очень дается, – отметил Сергей.

Кот стал всеобщим любимцем. Фото: интернет-канал aviator

Поговаривают также, что кто-то брал Басика с собой в полет в Симферополь, а потом вернул назад, но, вероятнее всего, это лишь слухи, которые придают коту дополнительной популярности.

Кот оказался очень добрым существом и с удовольствием дает себя погладить всем желающим. А если у кого-то есть время на игры, то он с радостью пошалит.

Любимец пилотов. Фото: интернет-канал aviator

Говорят, что у местных работников даже появилась интересная примета – если Басик провожает самолет, значит, полет пройдет отлично и волноваться не о чем.

Басик очень любит самолеты.Фото: интернет-канал aviator

Табулатура: Пилот – Про Кота.


D                    G         C 
1|------------2------------------------0-----|
2|-------3---------3---------0-----------1---|
3|-----2---2-----2---2-----0---0-----0-------|
4|--0----------------------------------------|
5|----------------------2---------3----------|
6|-------------------------------------------|
   D             G       C
За пятью холмами под лиловым небом
    D    G  C
Стоит дом.
У окна, на кресле, под зеленым пледом
Спит он.
Убежали люди, бросив вещи,
Такая вещь - война.
Своя шкура дороже, понятное дело,
Забыли кота.
   D                   A#*                  D(2 раза)       
1|------------2-------------------0-------------------2---------|
2|-------3---------3---------3---------3---------3---------3----|
3|-----2---2-----2---2-----3---3-----3---3-----2---2-----2---2--|
4|--0-------------------0-------------------0-------------------|
5|--------------------------------------------------------------|
6|--------------------------------------------------------------|
   D
Было время вспомнить
   A#*            D
И взять его с собой,
  
  A#*                   G         C         C    *D*
1|------------2-------------------0---------0-----1--|
2|-------3---------3---------0---------1----1-----2--|
3|-----3---3-----3---3-----0---0-----0---0--0--------|
4|--0---------------------------------------2--------|
5|----------------------2-------------------3--------|
6|------------------------------------------0--------|
   D
"Но до зверей ли тут?" -
  A#*              G     C   *D*
Скажет вам, наверно, любой.

Там, где в гриве лошадь золотистый вечер 
несла,
Ходит кот унылый во сне. У всех просит 
молока.
Встретят его скоро у ворот небесных 
теплом,
За пятью холмами, под лиловым небом
Стоит дом.
Примечание: A#* - 033000, *D* - 120000

Перебор подбирал сам.Аккорды подглядел.По "C" в третьей табе плавно провести рукой

Схема вышивки «кот летчик» (№1594002)

Создать новую схему Вышивка крестом • Авторы • rjycnfynbyjdf • Схемы вышивки • кот летчик 300×224 креста (в сантиметрах)

Гамма, 40 цветов,
перемешивание: 75%

Теги: летчик, летать, кот, самолет
Скачать черно-белую схему (*.pdf) Скачать цветную схему(*.pdf) В буквенно-цифровых обозначениях Схемы, похожие по картинке
Оригинал
Предпросмотр

8

3

Создана 5 ноя 2017 в 10:44. Эта схема в избранном у bedmarina, Lucrezia, Twinkle_cat, Alena52 и еще у 5 авторов. Схема была скачана 150 раз.

Комментарии к схеме вышивки «кот летчик» (№1594002)

kolombino, 5 ноя 2017 в 14:27.

+!!

Оставить комментарий

Схемы вышивки, похожие на «кот летчик» (№1594002) по сюжету

Ulmi,
14 ноя 2012 в 22:09. Кот
127×180 крестов.
DMC (ДМС), 50 цветов.
Теги: живопись, животные, кот, кошка. Наденька,
21 дек 2012 в 13:31. счастливый кот
300×201 крест.
Гамма, 120 цветов.
Теги: цветы . кот. одуванчики. _vika,
14 окт 2015 в 16:27. кот и самолет
200×112 крестов.
Гамма, 50 цветов.
19Irina61,
23 марта в 10:05. кот
301×340 крестов.
Гамма, 60 цветов.
Теги: мышь, животные, портрет, кот.

Пилот и его кот — ориджинал

Набросок из нескольких строк, еще не ставший полноценным произведением
Например, «тут будет первая часть» или «я пока не написала, я с телефона».

Мнения о событиях или описания своей жизни, похожие на записи в личном дневнике

Не путать с «Мэри Сью» — они мало кому нравятся, но не нарушают правил.

Конкурс, мероприятие, флешмоб, объявление, обращение к читателям
Все это автору следовало бы оставить для других мест.

Подборка цитат, изречений, анекдотов, постов, логов, переводы песен

Текст состоит из скопированных кусков и не является фанфиком или статьей.
Если текст содержит исследование, основанное на цитатах, то он не нарушает правил.

Текст не на русском языке
Вставки на иностранном языке допустимы.

Список признаков или причин, плюсы и минусы, анкета персонажей
Перечисление чего-либо не является полноценным фанфиком, ориджиналом или статьей.

Часть работы со ссылкой на продолжение на другом сайте
Пример: Вот первая глава, остальное читайте по ссылке…

Нарушение в сносках работы

Если в работе задействованы персонажи, не достигшие возраста согласия, или она написана по мотивам недавних мировых трагедий, обратитесь в службу поддержки со ссылкой на текст и цитатой проблемного фрагмента.

В воздушной катастрофе, пилот нападает на кошку, вынуждая самолет отклониться назад.

В странном инциденте пассажирский самолет в Судане был вынужден совершить вынужденную посадку после того, как пилот был атакован непослушным пассажиром – в данном случае, кошка!

Рейс, следовавший из международного аэропорта Хартума в столицу Катара Доху, пришлось перенаправить обратно в Судан, когда животное из семейства кошачьих, «незарегистрированный пассажир», было замечено в кабине пилота. Согласно местному Al Rakoba , инцидент произошел на рейсе 3T-234 компании Tarco Aviation, всего через полчаса до его вылета по расписанию.

Скорее всего, встревоженный своим полетом и людьми в незнакомой обстановке, кот начал наступать и повернулся к летному капитану, сопротивляясь всем попыткам поймать его. Поскольку это привело к необычной ситуации, пилот решил вернуться в Хартум, чтобы безопасно удалить нарушителя.

Хотя можно подумать, что преступник сбежал из личных вещей пассажира, похоже, что он, скорее всего, оказался бездомным. Согласно информации, полученной

Аль-Судани, самолет, Боинг 737, простоял в ангаре всю ночь для очистки и подготовки.Считается, что дикая кошка могла пробраться на борт и найти удобное место для отдыха, а только «захватить» кабину в воздухе.

Однако это не единственная катастрофа, произошедшая за последнее время. Ранее в прошлом месяце кошка устроила хаос в кабине израильской авиакомпании Эль Аль. Проникнув в кабину, он обгрыз внутренности, повредив несколько пластиковых кожухов и ручек.

וקר ציצתי על חתול שהסתנן לקוקפיט מטוס בואינג 737 של אל על.כך נראה תא הטייסים עכשיו, וואו.

ילום המטוס: עידו וכטל @ ynetalerts @CivMilAir pic.twitter.com/HdYoGNh4cV

– איתי בלומנטל Итай Блюменталь (@ItayBlumental) 7 февраля 2021 г.

По данным Newsweek , в июле прошлого года кошка была обнаружена в военном самолете, прибывшем в международный аэропорт Бангор в штате Мэн. Однако он был готов к полету и не возражал, когда его обнаружил экипаж грузового самолета, прячущийся за ящиками на борту.

Несмотря на то, что это странно, это не первый случай, когда кошка нападает на летного капитана в воздухе.В 2004 году пилот Брюссельских авиалиний стал жертвой нападения кошки, когда сбежавший из кошачьих животных выбежал из кабины. Согласно Mirror, животное сбежало из разрешенной авиакомпанией переноски для домашних животных и начало бегать рысью возле кабины. Он ворвался в кабину, когда член экипажа открыл дверь, чтобы подать закуски.

«Сердитый» кот нападает на пилота, вынуждая самолет совершить аварийную посадку

Кот явно неистовствовал в кабине самолета, который недавно направлялся в Катар.Согласно сообщению суданской газеты Al-Sundai , животное из семейства кошачьих было настолько разрушительным, что пилот фактически решил развернуть самолет и отказаться от запланированного маршрута полета.

Боинг 737 авиакомпании Tarco Airlines уже находился на 30-й минуте полета из Хартума, Судан, в столицу Катара Доху, когда, согласно сообщению от 25 февраля, в кабине самолета внезапно появился кот. Вероятно, встревоженный незнакомым окружением и людьми, кот мгновенно перешел в наступление, нападая на пилота и сопротивляясь попыткам поймать его.Вся сцена заставила пилота вернуться в Хартум, чтобы безопасно удалить кошачьего пассажира. Как отмечается в британском газете Metro , местные отчеты охарактеризовали кошку как «агрессивную и злую».

Пушистый безбилетный пассажир был назван диким животным из семейства кошачьих, и, согласно Al-Sundai , работники авиалинии полагают, что кошка, вероятно, села в самолет, когда тот стоял в ангаре на ночь для уборки. Также не исключено, что кошка могла пробраться на борт самолета во время предполетной проверки.

Airbus A380 за секунды до приземления в аэропорту Хитроу из Абу-Даби. iStock / Getty Images Plus

Вы не поверите, но это не первый случай, когда кошка неожиданно появляется в самолете. Еще в июле кошка была обнаружена в военном самолете, прибывшем в международный аэропорт Бангор в штате Мэн. Грузовой самолет Boeing C-17 Globemaster III первоначально взлетел на базе ВВС США Трэвис в Калифорнии и остановился в Колорадо-Спрингс, прежде чем прибыть в Бангор.

В то время было неясно, как и когда кошка оказалась в грузовом самолете, однако, похоже, она наслаждалась поездкой и сохраняла дружелюбный характер, когда члены экипажа обнаружили серо-белое животное из семейства кошачьих, прячущееся за ящиками на борту самолета. самолет.

«Мы называем это« миссией по восстановлению кошачьих », – сказала тогда Bangor Daily News Эми Тибодо, менеджер по маркетингу и развитию бизнеса аэропорта. «Насколько известно, это первый аэропорт Бангора».

По сообщениям, кошка была доставлена ​​в Бангорское гуманитарное общество. Люди в приюте для животных работали над тем, чтобы выяснить, ищут ли кошки владельцы, поэтому они регулярно публиковали сообщения о кошке в социальных сетях. После нескольких недель отсутствия ответов на сообщения о кошке приют официально отправил кошку на усыновление.Он быстро нашел дом у Нанси Хэмлин, которая работает в международном аэропорту Бангора, и получила соответствующее имя: Cargo.

«Зная груз так, как мы это делаем сейчас, мы можем понять, почему он был в этом самолете», – сказал Хэмлин Bangor Daily News в отдельном отчете. «У него нет страха, и он любит быть сверху или внутри всего».

Хэмлин добавил: «Он настоящий спитфайр, и мы называем его тасманским дьяволом. Обычно он действительно начинает ходить около двух часов ночи».

Злой кот напал на пилота, вынудившего Boeing 737 переадресовать

Регулярный рейс из Судана в Катар был вынужден вернуться в исходное положение после того, как кабина самолета была захвачена пушистым разведчиком.Ситуация с когтями возникла после того, как кот, который, как считалось, прятался во время уборки, проснулся и испугался своего нового окружения. Он напал на капитана, заставив самолет вернуться в Хартум и рассказав пассажирам шипящую историю о сбое в рейсе.

Пилот Боинга 737 подвергся нападению кота! Фото: Tarco Aviation / Simple Flying

Полет Tarco Air принес ужасающий результат

Некоторые истории об авиации кажутся невероятными, но в данном случае мы совсем не котята.Рейс Tarco Airlines из Хартума (KRT) в Доху (DOH) должен был вернуться в исходное положение после того, как пилоты вскоре после взлета столкнулись с покрытым мехом противником.

Боинг 737 вылетел из Хартума вовремя и примерно через 30 минут пути, когда произошла катастрофа. К великому удивлению суданских пилотов, в кабине неожиданно появился безбилетный пассажир из семейства кошачьих.

Согласно сообщениям в Аль-Судани, котенок не был счастливым пассажиром и напал на капитана.В то время как команда изо всех сил пыталась поймать агрессивного безбилетного пассажира, подобраться к пушистому угонщику оказалось невозможным. Не имея возможности продолжить путешествие, пилоты, к удивлению пассажиров, принялись возвращаться в Хартум.

Экипаж был удивлен, обнаружив компанию в кабине. Фото: Tarco Aviation

Хотя вы можете предположить, что непослушный кот сбежал из вещей пассажира, похоже, что он, скорее всего, был диким животным из семейства кошачьих, который искал удобное место для отдыха.Аль-Судани сообщил, что самолет простоял в ангаре всю ночь для очистки и подготовки. Считается, что кошка пробралась на борт и нашла удобное место для отдыха в кабине.

Конечно, код ИКАО для Хартума – HSSS – полностью случайен, но он прекрасно выражает эмоции, которые испытывает кот, обнаружив, что он находится на высоте нескольких тысяч футов.

Будьте в курсе: Подпишитесь на наш ежедневный дайджест авиационных новостей.

Не первая кошачья атака в воздухе

Хотя эта история несколько необычна, более удивительно то, что это не первый случай, когда подобный инцидент происходит в воздухе.В августе 2004 года пилот авиакомпании «Брюссельские авиалинии» стал жертвой смертельной травмы, когда сбежавшее животное из семейства кошачьих выбежало из кабины.

Самолет Avro RJ летел из Брюсселя в Вену с 62 людьми на борту, когда в кабине появилась кошка. Животное, по-видимому, сбежало из разрешенного авиакомпанией контейнера и начало сновать по салону. Член кабинного экипажа открыл дверь кабины, чтобы подать прохладительные напитки членам экипажа, и котенок воспользовался возможностью.

Перед выходом на пенсию у Avro RJ Брюссельских авиалиний также произошел инцидент с кошкой. Фото: Брюссельские авиалинии

Вероятно, пытаясь сбежать из своей летающей тюрьмы, кот выстрелил в кабину и сразу обнаружил, что он был в еще большей ловушке, чем раньше. Сообщается, что он очень взволновался и начал копаться в кабине экипажа, царапая руку второго пилота. Обеспокоенные ущербом, который это существо может нанести чувствительному оборудованию кабины, пилоты приняли решение вернуться в Брюссель примерно через 20 минут после взлета.

Авиакомпания описала ситуацию как «странный инцидент», заявив, что множество совпадений совпали, что привело к необычному происшествию.

Для Tarco Airlines это, вероятно, результат опыта. Как мы видели в прошлом, кошки умеют проникать даже в самые безопасные места, поэтому они могут захотеть усилить предполетные проверки, чтобы избежать аналогичной шипящей ситуации в будущем.

Пассажирский самолет аварийно приземлился после нападения безбилетной кошки. Пилот

Официальные лица сообщают, что никто серьезно не пострадал в результате инцидента и что домашняя кошка, вероятно, была бездомной, которая забрела в самолет накануне вечером.

Wikimedia Commons Международный аэропорт Хартум, где самолет был вынужден приземлиться.

Рейс, вылетавший из столицы Судана Хартума, был вынужден приземлиться на прошлой неделе, когда на пилота напала безбилетная кошка.

Согласно Fox News , рейс Tarco Aviation должен был занять чуть менее четырех часов и благополучно прибыть в столицу Катара Доху. Однако именно на крейсерской высоте от 30 минут до часа после вылета неожиданный пассажир из семейства кошачьих появился в кабине и царапнул испуганного пилота.

К несчастью для пассажиров на борту, пилот был вынужден совершить аварийную посадку в международном аэропорту Хартума после того, как попытки экипажа усмирить кошку потерпели неудачу.

Хотя остается неясным, насколько серьезно пилот был ранен во время этого очевидного кетфайта, существует объяснение того, как животное тайком поднялось на борт самолета.

Pixabay: Кот, похоже, сел в самолет, а Боинг 737 был припаркован в ангаре.

Поскольку ни один из пассажиров не забрал животное, власти в настоящее время уверены, что кошка «проникла» в самолет, поскольку он находился в ангаре международного аэропорта Хартума в ночь перед взлетом. Предположительно, он просто томился там, пока внезапно не оказался на крейсерской высоте с несколькими сотнями ничего не подозревающих пассажиров среди него.

К тому времени, когда экипаж заметил животное, оно уже доставило слишком много хлопот и слишком сильно отвлекало, чтобы полет продолжался по плану.По данным NDTV , кот находчиво уклонялся от всех, кто пытался его поймать.

Как ни странно, это не первый случай, когда кошка доставляет проблемы сотрудникам аэропорта или членам экипажа. Только в 2019 году сотрудники службы безопасности в аэропорту острова Мэн обнаружили кошку, запакованную в багаже ​​пары. Умышленно спрятанный или нет, хозяин кошки определенно выглядел удивленным.

Wikimedia Commons Рейс вылетел из Хартума всего за 30 минут до того, как разразился изнурительный инцидент.

«Мы были полностью шокированы», – сказал тогда владелец кошки. «Должно быть, она пробралась в сумку перед тем, как мы уехали в аэропорт, но мы не слышали и не чувствовали ее по дороге туда».

Был также инцидент в августе 2004 года, когда кошка напала на пилота рейса из аэропорта Брюсселя, следовавшего в Вену, Австрия. Согласно The Mirror , на борту самолета Avro RJ находились 62 пассажира, и никто не знал о присутствии животного до того, как оно атаковало.

Животные, естественно, представляют значительный риск для встречи на высоте 36 000 футов, так как с большинством из них невозможно поверить или управлять ими. Однако наиболее опасными являются те, которые находятся по другую сторону герметичной кабины, поскольку птицы могут попасть в турбины и подвергнуть серьезной опасности всех, кто находится на борту.

К счастью для пассажиров прошлогоднего рейса GoAir из Ахмадабада в Джайпур в Индии, птицы, с которыми они столкнулись, порхали внутри самолета еще до того, как он взлетел. В конце концов, кажется, что, несмотря на наши человеческие достижения, мы все еще являемся частью этого естественного мира – и нам просто придется продолжать с ним спорить.


Прочитав о безбилетном коте, который напал на коммерческого пилота и заставил его совершить аварийную посадку, узнайте о человеке, который был арестован с двумя фунтами золота в прямой кишке в индийском аэропорту. Затем прочитайте о рейсе American Airlines, который столкнулся с НЛО над Нью-Мексико.

Дикий кот садится на самолет, атакует пилота в середине полета

Путешествие на самолете может быть немного менее популярным в наши дни, учитывая, что глобальная пандемия все еще бушует в большинстве стран, но это не помешало одному резвому животному из семейства кошачьих почувствовать потребность в прыжке.Кошке, которая, очевидно, была одичавшей или бродячей, удалось пробраться на борт Boeing 737 авиакомпании Tarco в Судане. Полет, направлявшийся в Катар, пришлось прервать после того, как котенок решил, что сообщит о своем присутствии, напав на пассажиров в кабине.

Это очень странная история, но она также имеет смысл, если вы что-то знаете о кошках. Каким-то образом животное пробралось в самолет и спряталось в темном месте кабины, что очень по кошачьему занятию.Рейс улетел, и какое-то время кошка пряталась, вероятно, боясь за свою жизнь из-за шума и грохота самолета. Примерно через полчаса животное из семейства кошачьих почувствовало себя достаточно комфортно, чтобы появиться, только чтобы найти очень сбитого с толку пилота.

Сегодняшнее Top Deal Роскошные простыни с 100 000 5-звездочными отзывами на Amazon начинаются всего с 22 долларов в этой удивительной распродаже! Прейскурантная цена: 27,99 долларов США Цена: 22,39 долларов США Вы экономите: 5,60 долларов США (20%) Купить сейчас Доступно на Amazon, BGR может получать комиссию Доступно на Amazon BGR может получать комиссию

По сообщению суданского информационного агентства Al-Sundai , самолет должен был приземлиться в столице Катара Дохе.К сожалению, когда кошка выскочила из кабины, она достаточно испугалась ситуации, чтобы начать атаковать пилота. Когда сотрудники попытались поймать кошку и сдержать ее, она сбежала. Кошки – это в основном пушистая вода, поэтому это неудивительно.

Пилоту ничего не оставалось, как развернуться в воздухе и вернуться в аэропорт вылета, чтобы удалить кошку. Сообщается, что самолет недавно хранился в ангаре, пока ожидал очистки, поэтому вполне возможно, что кошке удалось забраться на борт во время этого простоя, но никто не может сказать наверняка.

Несмотря на сообщения о том, что на пилота напал кот, нет никаких упоминаний о каких-либо травмах, полученных кем-либо, в том числе и самцом из семейства кошачьих. Кот, конечно, понятия не имел, что делает, когда пробрался на борт самолета, и неясно, что персонал сделал с кошкой, когда им снова удалось приземлиться в самолете. Будучи дикой кошкой, она, возможно, не подходила для взращивания или усыновления, поэтому будем надеяться, что ее не постигла мрачная участь.

Кажется, немного беспокоит то, что такое животное, как кошка, могло незаметно пробраться на борт коммерческого авиалайнера.Поскольку безопасность авиаперелетов является главным приоритетом для регулирующих органов и других наблюдательных групп, вы должны задаться вопросом, насколько легко было бы человеку проникнуть на борт самолета – возможно, посадить что-то или каким-то другим образом саботировать транспортное средство – если бы обстоятельства были то же.

В любом случае, кошка, вероятно, больше не будет приближаться ни к чему с крыльями, и это, вероятно, хорошо.

Сегодняшнее Top Deal Роскошные простыни с 100 000 5-звездочными отзывами на Amazon начинаются всего с 22 долларов в этой удивительной распродаже! Прейскурантная цена: 27 долларов.99 Цена: $ 22,39 Вы экономите: $ 5,60 (20%) Купить сейчас Доступно на Amazon, BGR может получать комиссию Доступно на Amazon BGR может получать комиссию

границ | Омепразол минимально изменяет фекальное микробное сообщество у шести кошек: пилотное исследование

Введение

Показано, что они превосходят антагонисты гистаминовых 2 рецепторов в повышении pH желудочного сока у кошек, ингибиторы протонной помпы (ИПП) часто являются препаратами первого выбора, назначаемыми кошкам с заболеваниями, которые могут привести к язвенному эзофагиту, повышенной кислотности желудочного сока и желудочно-кишечному тракту. GI) кровотечение (1, 2).ИПП исторически считались относительно безопасными лекарствами; однако недавние сообщения о людях предполагают их связь с широким спектром заболеваний, таких как дефицит кобаламина, переломы, связанные с остеопорозом, и внебольничная пневмония (3–5).

Производство кислоты желудочного сока служит первой линией защиты от проглоченных кислоточувствительных инфекционных агентов (6). Следовательно, повышение pH желудочного сока, вызванное ИПП, также может привести к чрезмерному росту бактерий в желудке и развитию кишечных инфекций (7).Действительно, у людей использование ИПП было связано с повышенным риском кишечных инфекций, вызываемых Clostridium difficile (8–10) и избыточного бактериального роста в тонком кишечнике (11). Есть несколько ветеринарных исследований, оценивающих влияние ИПП на микробиом. Оценивая содержимое толстой кишки крыс, Kanno et al. показали, что пероральный прием омепразола приводит к дозозависимому увеличению всех кишечных бактерий, за исключением Bifidobacterium (12). Влияние омепразола на микробиоту желудочно-кишечного тракта также недавно было изучено на собаках.Прием омепразола два раза в день в течение 15 дней увеличивал количество фекалий Lactobacillus у всех исследуемых собак и уменьшал Faecalibacterium и Bacteroidetes Prevotella Prophyromonas в группе собак-самцов с наиболее значительными эффектами у кобелей. тонкий кишечник (13). Снижение фекального Faecalibacterium также происходит у людей, получающих ИПП (14). Несмотря на широкое использование ИПП у кошек, ни одно исследование не изучало их влияние на состав микробиома кошек.

Предыдущий независимый от культуры анализ 16S рибосомной РНК (рРНК) в образцах фекалий здоровых кошек показал, что преобладает тип Firmicutes, за которым следуют Proteobacteria, Bacteroidetes, Fusobacteria и Actinobacteria соответственно (15-17). Хотя эти результаты аналогичны результатам, обнаруженным у собак, у кошек в тонком кишечнике больше анаэробных бактерий, чем у их собачьих собратьев (18–20). Кроме того, кошки являются «облигатными» плотоядными животными, и их рацион состоит в основном из белков животного происхождения с добавлением волокнистых материалов на растительной основе (21).Эти различия предполагают, что фекальный микробиом кошек может иначе реагировать на хроническое введение ИПП, чем собаки.

Изменение микробиоты может привести к изменениям относительных концентраций низкомолекулярных метаболитов, включая липиды, сахара и аминокислоты. Следовательно, оценка метаболомики в сочетании с микробиомом может дать функциональный обзор биохимических процессов, которые могут измениться в результате введения ИПП (22). Например, у людей терапия омепразолом приводит к увеличению лактата, что может быть результатом чрезмерного роста Streptococcus spp.которые производят лактат путем ферментации (23, 24). Также было показано, что при введении омепразола грызунам происходит избыточный рост лактат-продуцирующих бактерий (12). На сегодняшний день ветеринарные исследования не оценили влияние ИПП на фекальный метаболом кошачьих.

Вышеупомянутые исследования на людях и собаках вызывают опасения, что длительная терапия ИПП может быть небезопасной для кошек; однако до настоящего времени влияние введения ИПП на состав микробиоты и метаболома в кале кошек не оценивалось.Центральной целью этого исследования было оценить влияние хронического приема омепразола на бактериальный микробиом и метаболом фекалий здоровых кошек. Основываясь на предыдущих исследованиях, проведенных на людях, крысах и собаках, мы предположили, что пероральное введение омепразола приведет к снижению фекальных Faecalibacterium и Helicobacter spp. и увеличение групп Lactobacillus и Clostridium у здоровых кошек.

Материалы и методы

Кошки

Это исследование включало шесть взрослых домашних короткошерстных кошек, которые были частью ранее опубликованного исследования, в котором оценивалось влияние хронического перорального приема омепразола на сывороточные концентрации кальция, магния, кобаламина и гастрина, а также минеральную плотность костей у кошек (25).В пилотное исследование были включены шесть кошек, так как это минимальное рекомендуемое количество пациентов, необходимое для проведения фармакологических исследований (26). Комитет по институциональному уходу и использованию животных Университета Теннесси одобрил протокол этого исследования (32312-0115). Объектами исследования были три стерилизованных кошки и три кастрированных кота в возрасте 7–10 лет (медиана 8 лет) со средним весом 4,14 кг (3,22–5,46 кг). Перед включением в исследование кошки были признаны здоровыми на основании обычного медицинского анамнеза и нормального физического обследования, анализа крови (общий анализ крови, химический анализ сыворотки крови, ТТ4) и анализа мочи.Все кошки получали поддерживающую диету (Hill’s Science Diet, Hill’s Nutrition, Топика, Канзас, США) до, во время и после периода исследования. Кошки, получавшие антибиотики, были исключены из исследования. Однако кошка, которая получала метронидазол с 14 по 16 день терапии омепразолом, была включена на основании того, что было показано, что микробиом собак вернулся к норме через 2 недели после приема метронидазола (Flagyl, Pfizer Inc., Нью-Йорк, Нью-Йорк, США). ) администрация (27). У кошки развилась диарея, частый побочный эффект омепразола, на 14-й день терапии омепразолом, и диарея быстро исчезла после введения метронидазола.Поскольку следующий образец стула был взят через 2 недели после прекращения приема метронидазола на 30-й день, было сочтено, что это вряд ли повлияет на результаты, наблюдаемые на 30-й день, и кошка была включена. Другая кошка, которая получала тригидрат амоксициллина / клавуланат калия (Clavamox Drops, Zoetis Services LLC., Парсиппани, Нью-Джерси, США) в дни с 10 по 24 плацебо, была включена в исследование, поскольку между 0 и 30 днями плацебо не было выявлено значительных различий. Аппетит и активность не изменились до, во время и после антибактериальной терапии ни у одной из кошек.

Дизайн исследования и сбор образцов кала

A внутри субъектов, до и после, было проведено исследование, в котором все кошки получали 60 дней последовательного лечения плацебо (250 мг лактозы, инкапсулированной в желатиновые капсулы размера # 3, Spectrum Chemical Mfg Corp., Гардена, Калифорния, США) на os каждые 12 часов, затем 5 мг (0,83–1,6 мг / кг) per os каждые 12 часов омепразол (Dexcel Pharma Technologies Ltd., Йокнеам, Израиль) после 4-дневного периода отдыха (25). Было проведено исследование до и после, а не перекрестный дизайн, учитывая, что необходимый период вымывания для введения омепразола неизвестен.В дни 0 («исходный уровень»), 30 и 60 лечения плацебо и омепразолом у каждой кошки собирали пробы фекалий в свободном доступе. Образцы собирали утром и в течение 12 часов после дефекации. Было показано, что хранение при комнатной температуре до 24 часов перед анализом образцов оказывает минимальное влияние на целостность экстрагированной нуклеиновой кислоты и состав микробного сообщества в образцах стула как человека, так и кошек (28, 29). После сбора образцы фекалий хранили при -80 ° C до анализа.

Экстракция ДНК и секвенирование 16S рРНК

Экстракция, секвенирование и анализ данных микробиома и метаболома выполнялись аналогично описанному ранее (30). Вкратце, геномную ДНК экстрагировали из аликвот 100 мг фекалий с использованием имеющегося в продаже набора для экстракции (PowerSoil ® , Mo Bio Laboratories, Карлсбад, Калифорния, США) в соответствии с инструкциями производителя. Секвенирование бактериальных генов 16S рРНК компанией Illumina было выполнено с использованием праймеров от 515F (5′-GTGCCAGCMGCCGCGGTAA-3 ‘) до 806R (5′-GGACTACVSGGGTATCTAAT-3’) в лаборатории MR DNA (www.mrdnalab.com, Shallowater, TX, USA).

Анализ генов 16S рРНК

Необработанные данные последовательности были отобраны, обрезаны, отфильтрованы и закодированы штрих-кодом, а также химерные последовательности, удаленные из набора данных, с использованием конвейера QIIME v1.8.0 (31) и UCHIME (32). Операционные таксономические единицы (OTU) были назначены на основе не менее 97% сходства последовательностей с эталонной базой данных Greengenes (33). Информация о последовательностях доступна через базу данных NCBI GenBank в коротком архиве чтения под регистрационным номером SRP097213.

Альфа-разнообразие измерялось с помощью показателей Chao1 (богатство), разнообразия Шеннона и наблюдаемых показателей OTU. Бета-разнообразие оценивали с помощью взвешенной метрики расстояния UniFrac (34) на основе филогении и визуализировали с помощью графиков анализа главных координат.

Количественная ПЦР в реальном времени (кПЦР)

В целях подтверждения результатов секвенирования Illumina, бактериальные сообщества фекалий, которые показали значительное изменение процентной последовательности при лечении омепразолом, были дополнительно оценены с помощью количественной ПЦР.Содержание Clostridium perfringens, Clostridium hiranonis, Clostridium difficile и Bifidobacterium spp. были оценены с помощью кПЦР в полученных образцах фекальной ДНК с использованием опубликованных олигонуклеотидов. Цикл кПЦР, праймерные олигонуклеотидные последовательности и соответствующие температуры отжига для выбранных бактериальных групп были описаны ранее (13, 30, 35, 36). Данные кПЦР выражали в виде логарифма количества ДНК (фг) для каждой бактериальной группы на 10 нг выделенной тотальной ДНК.

Метаболомика

Образцы фекалий хранили при -80 ° C до отправки на сухом льду для подготовки и анализа Центром метаболомики Западного побережья (Калифорнийский университет, Дэвис, Калифорния, США). Образцы фекалий в аликвотах примерно по 10 мг подвергали гомогенизации и экстракции. После центрифугирования высушенный супернатант ресуспендировали в метаноле / хлороформе и добавляли внутренние стандарты. Образцы дериватизировали гидрохлоридом метоксиамина в пиридине и N -метил- N -триметилсилилтрифторацетамидом, как описано ранее (30).Фекальный метаболом охарактеризовали методами нецелевой масс-спектрометрии, как описано ранее (30, 37).

Статистический анализ

Для оценки различий в общем составе микробиоты (т. Е. Β-разнообразия) между группами был проведен анализ сходства (ANOSIM) с использованием взвешенных матриц расстояний UniFrac. Индексы разнообразия Шеннона-Уивера и Chao1 были рассчитаны для оценки разнообразия микробиоты GI с использованием QIIME (38, 39). Индексы бактериального разнообразия, данные секвенирования (процент видов), данные количественной ПЦР для каждой бактериальной группы и данные метаболомики были отдельно проанализированы с использованием двухфакторного дисперсионного анализа с повторными измерениями (ANOVA) и протестированы для учета эффектов фазы. лечения, времени измерения и взаимодействия фазы и времени.Нормальность остатков ANOVA оценивалась с помощью статистики Шапиро-Уилка W с предположением равных дисперсий, проверенных с использованием критерия Левена F . При необходимости данные были зарегистрированы, ранжированы или преобразованы квадратный корень по мере необходимости, чтобы соответствовать предположению нормальности ANOVA. Для Phyla Fusobacteria и Proteobacteria требовалась ранговая трансформация, для Phylum Bacteroidetes требовалась логарифмическая трансформация, а для остальных Phyla Actinobacteria и Firmicutes трансформация не требовалась.Трансформации для родов выполняли следующим образом: логарифмическая трансформация для родов Streptococcus и Clostridium и ранговая трансформация для родов Bifidobacterium и Lactobacillus . Поправка на множественные сравнения была достигнута через коэффициент ложного обнаружения Хохберга. Значение p <0,05 считалось значимым. Наконец, в качестве пилотного исследования был проведен анализ мощности для определения размера выборки, необходимого для того, чтобы иметь 80% шанс обнаружения общих различий между исходным уровнем (день 0) и день 30 введения омепразола для бактериальных групп, которые не корректировали p – значения <0.05 со значением альфа 0,05. Для всех статистических тестов и генерации сводной статистики использовалось коммерчески доступное программное обеспечение (SAS 9.4, SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США).

Результаты

Неблагоприятные эффекты приема омепразола и других методов лечения

Ни у одной кошки не развились побочные эффекты во время фазы исследования плацебо; однако у одной кошки появились симптомы нижних мочевыводящих путей. Несмотря на то, что общий анализ мочи и посев мочи не были примечательными, наблюдающий лабораторный ветеринар рекомендовал антибактериальную терапию, и кошка получала тригидрат амоксициллина / клавуланат калия (Clavamox Drops, Zoetis Services LLC., Парсиппани, Нью-Джерси, США) с 10 по 24 день приема плацебо. Клинические побочные эффекты у исследуемых кошек были редкостью. У одной кошки во время приема омепразола в течение 3 дней развилась периодическая гипорексия и диарея (оценка кала 5). Диарея быстро исчезла после приема метронидазола. Аппетит и активность не изменились ни до, ни во время, ни после антибиотикотерапии ни у одной из кошек, получавших антибиотики.

Микробные сообщества

Графики анализа главных координат не выявили каких-либо значительных изменений взвешенных расстояний UniFrac при введении омепразола (ANOSIM; p = 0.530). Введение омепразола также не было связано со значительными различиями в индексах фекального бактериального разнообразия Шеннона-Уивера или Chao1 в оцененные временные точки ( p = 0,287 и p = 0,142, соответственно).

Исходно до введения плацебо или омепразола наиболее распространенным филумом был Firmicutes, за которым следовали Actinobacteria, Bacteroidetes, Proteobacteria и Fusobacteria (рис. 1). Процент последовательности Proteobacteria на исходном уровне (день 0) был значительно выше для омепразола (T2, 0.6%), чем для плацебо (T1, 0,4%) ( p = 0,014) (таблица 1). Не было отмечено значительных различий в процентном соотношении последовательностей Firmicutes ( p = 0,942), Actinobacteria ( p = 0,619), Bacteroidetes ( p = 0,936) и Fusobacteria ( p = 0,783) в омепразоле и группы плацебо на исходном уровне (таблица 1).

Рисунок 1 . Состав фекальной бактериальной микробиоты по типам. (A) Данные представлены для плацебо и омепразола на исходном уровне (день 0), 30 день и 60 день.Полосы представляют собой средний процент последовательностей, составляющий 100% в каждый момент времени. (B) Те же данные, сфокусированные на Fusobacteria и Proteobacteria, представлены для плацебо и омепразола на исходном уровне (день 0), день 30 и день 60.

Таблица 1 . Относительное количество типов бактерий на исходном уровне для плацебо и омепразола.

Введение омепразола привело к увеличению процента последовательности Firmicutes через 30 дней (73,9%) и 60 дней (67.4%) приема омепразола (нескорректированное p = 0,023, рисунок 1). Это увеличение было вызвано увеличением родов Lactobacillus, Streptococcus, Clostridium и Faecalibacterium , как показано на рисунках 2B – E. Средний процент последовательности Lactobacillus увеличился при терапии омепразолом, при этом наибольшая распространенность по сравнению с исходным уровнем (день 0, 0,2%) была отмечена на 30 день (1,4%) терапии омепразолом, и возврат к исходному уровню на 60 день (0,5%) терапии омепразолом (нескорректированное значение p = 0.009, рис. 2D). Средний процент последовательностей Streptococcus рода был выше исходного уровня (3,5%) через 30 дней (21,4%) и 60 дней (19,8%) после терапии омепразолом (нескорректированный p = 0,024, рисунок 2B). По сравнению с исходным уровнем (0,5%) процент последовательности Clostridium также увеличивался через 30 дней (2,7%) и 60 дней (1,6%) терапии омепразолом (нескорректированный p = 0,002, рисунок 2C). Основными видами, способствовавшими увеличению Clostridium , были C.perfringens и C. hiranonis (рис. 3). По сравнению с исходным уровнем (0,09%) процент последовательностей рода Faecalibacterium увеличился на 30 дней (0,3%) терапии омепразолом (нескорректированный p = 0,040), вернулся к исходному уровню на 60 день терапии омепразолом (рис. 2E). ). Однако значимость была потеряна для типа Firmicutes и родов Lactobacillus, Streptococcus, Clostridium и Faecalibacterium , которые привели к изменению после корректировки для множественных сравнений ( p = 0.080, p = 0,292, p = 0,363, p = 0,292 и p = 0,426 соответственно).

Рисунок 2 . Относительная численность фекальной бактериальной микробиоты по родам. Данные представлены для дня 0 (исходный уровень), 30 дня (после 4 недель лечения) и 60 дня (после 8 недель лечения) плацебо (250 мг лактозы перорально каждые 12 ч, серые ромбы) и омепразола (5 мг омепразола. ПО каждые 12 ч, черные квадраты) администрация. Планки погрешностей представляют SEM.Обратите внимание, что ось y находится в разном масштабе для каждой группы бактерий. (A) Bifidobacterium , (B) Streptococcus , (C) Clostridium , (D) Lactobacillus , , E) Faecalib (E) Хеликобактер .

Рисунок 3 . Относительное содержание бактериальной микробиоты в фекалиях по видам. Данные представлены для дня 0 (исходный уровень), 30 дня (после 4 недель лечения) и 60 дня (после 8 недель лечения) плацебо (250 мг лактозы перорально каждые 12 ч, серые ромбы) и омепразола (5 мг омепразола. ПО каждые 12 ч, черные квадраты) администрация.Планки погрешностей представляют SEM. Обратите внимание, что ось y находится в разном масштабе для каждой группы бактерий. (A) Clostridium perfringens и (B) Clostridium hiranonis .

Введение омепразола привело к снижению по сравнению с исходным уровнем (день 0, 45,4%) процентной доли актинобактерий в последовательности через 30 дней (25,3%) и 60 дней (29,5%) приема омепразола (нескорректировано p = 0,007, рисунок 1) , но разница между временными точками потеряла статистическую значимость с поправкой на множественные сравнения ( p = 0.071). Среди филы Actinobacteria единственными таксонами, которые изменились при введении омепразола, был род Bifidobacterium . Хотя это и не является статистически значимым после корректировки для множественных сравнений, средний процент микробиоты из рода Bifidobacterium был ниже (8,9%) на 30-й день введения омепразола по сравнению со всеми другими временными точками (без корректировок p = 0,009, p = 0,292, рис. 2А). Процент последовательности Bifidobacterium увеличивался при продолжении введения омепразола после 30-го дня, но продолжал отличаться от исходного уровня (0-й день) на 60-й день лечения омепразолом.Однако значимость была потеряна после множественных сравнений ( p = 0,292).

Введение омепразола не было связано с какими-либо значительными изменениями процентного содержания последовательностей филы Bacteroidetes, Proteobacteria или Fusobacteria ( p = 0,256, p = 0,071, p = 0,115, соответственно). Внутри филы Proteobacteria процент последовательностей рода Helicobacter не изменился при введении омепразола ( p = 0.531, рисунок 2F).

Количественная ПЦР в реальном времени

Анализ с помощью кПЦР показал, что не было значительных эффектов введения омепразола на количество фекалий C. perfringens ( p = 0,703), C . hiranonis ( p = 0,857), C. difficile ( p = 0,703) и Bifidobacterium spp. ( p = 0,438) (Рисунок 4). До корректировки для множественных сравнений только Bifidobacterium spp.был значимым (нескорректированный p = 0,038).

Рисунок 4 . Количественные результаты ПЦР в реальном времени на бактериальную микробиоту фекалий. Данные представлены для дня 0 (исходный уровень), 30 дня (после 4 недель лечения) и 60 дня (после 8 недель лечения) плацебо (250 мг лактозы перорально каждые 12 ч, серые ромбы) и омепразола (5 мг омепразола. ПО каждые 12 ч, черные квадраты) администрация. Планки погрешностей представляют SEM. Обратите внимание, что ось y находится в разном масштабе для каждой группы бактерий.Обратите внимание, что ось y находится в разном масштабе для каждой группы бактерий. (A) Clostridium perfringens , (B) Clostridium hiranonis и (C) Bifidobacterium .

Метаболомика

Всего в образцах фекалий кошек было идентифицировано 250 соединений с уникальными названиями и 428 соединений без названия. После корректировки для множественных сравнений ни одно из этих соединений не изменилось существенно при введении омепразола (рис. 5).Однако нескорректированные значения p показали, что концентрация O, -ацетилсерина и аминомалоната в фекалиях снижалась при терапии омепразолом (нескорректированные значения p 0,015 и 0,040, соответственно, таблица S1 в дополнительных материалах). Концентрация кетогексозы снизилась на 30-й день терапии омепразолом (нескорректированный p = 0,0387), но концентрация на 60-й день не отличалась от исходного уровня.

Рисунок 5 . Тепловая карта, показывающая относительное распределение метаболитов.Каждый столбец представляет собой отдельный образец, и образцы сгруппированы по дням обработки по оси x .

Обсуждение

Ингибиторы протонной помпы, такие как омепразол, широко используются в медицине и ветеринарии для лечения заболеваний, связанных с кислотой. Ингибирование кислоты желудочного сока путем введения ИПП может привести к увеличению микробной нагрузки, попадающей в тонкий кишечник. У людей употребление ИПП было связано с внебольничной пневмонией, C.difficile-, а также избыточный бактериальный и грибковый рост (8, 9, 24, 40–45). Было показано, что омепразол изменяет микробиом собак; тем не менее, ни в каких исследованиях не изучалось его влияние на фекальный микробиом и метаболом у кошек, несмотря на его широкое применение (13). Целью этого пилотного исследования было изучить влияние длительного приема омепразола на фекальную бактериальную микробиоту и метаболом здоровых кошек.

В этом пилотном исследовании пероральное введение омепразола не привело к значительным изменениям в фекальном микробиоме и метаболоме здоровых кошек при введении в течение 60 дней или менее.Хотя в этом пилотном исследовании не было значительных изменений, наша цель состояла в том, чтобы определить конкретные группы бактерий и их метаболиты, которые требуют оценки на более широкой популяции здоровых кошек и кошек с заболеваниями желудочно-кишечного тракта. Следовательно, мы сообщаем об относительной численности нескольких родов бактерий, которые изменились при введении омепразола, но потеряли значимость с поправкой на множественные сравнения.

Еще до введения омепразола кошки, включенные в настоящее исследование, имели высокий процент актинобактерий из-за более высокого процента Bifidobacterium , чем сообщалось ранее в литературе для здоровых кошек (46, 47).Однако на сегодняшний день это единственные два исследования, посвященных фекальной микробиоте здоровых кошек.

Хотя значимость была потеряна после корректировки для множественных сравнений, результаты секвенирования 16S рРНК показали, что введение омепразола увеличивало процент последовательностей Streptococcus, Lactobacillus, Clostridium и Faecalibacterium spp. и уменьшил таковой у Bifidobacterium spp. в кале всех кошек. В ротоглотке преобладают Streptococcus и Lactobacillus , которые обычно не могут выжить в кислой среде желудка.В соответствии с предыдущими исследованиями на собаках, людях и крысах, которым вводили ИПП, кошки в этом исследовании имели повышенный процент последовательностей Streptococcus spp. и Lactobacillus spp. (12, 13, 48). Это относительное увеличение, вероятно, является результатом колонизации желудка и размножения ротоглоточных бактерий, вторичных по отношению к индуцированному PPI подавлению кислоты.

Процент последовательности фекалий Clostridium spp. увеличивалось при введении омепразола у всех кошек, хотя результаты не были значимыми после корректировки для множественных сравнений. C. difficile. -ассоциированное заболевание является серьезным поводом для беспокойства при использовании длительного лечения омепразолом у людей (8, 9, 42). Результаты нескорректированного секвенирования 16S рРНК из этого пилотного исследования на кошках показали относительное увеличение C. hiranonis и C. perfringens . В результате сглаживания ворсинок C. perfringens продуцирует энтеротоксины, которые стимулируют секрецию слизистой оболочки и последующую диарею. C. hiranonis приводит к выработке вторичных желчных кислот, которые могут повредить эпителий (49). C. hiranonis считается членом нормальной микрофлоры толстого кишечника; однако C. hiranonis был обнаружен в ткани двенадцатиперстной кишки у 33,3% собак с заболеванием желудочно-кишечного тракта по сравнению с 16,7% здоровых собак (50). Для оценки влияния длительного введения омепразола на процент последовательности и стойкость изменений в Clostridium spp. Показано большее количество исследуемых пациентов, в идеале со сбором образцов тканей.

Хотя значимость снова была потеряна после поправки на множественные сравнения, введение омепразола уменьшило процент последовательности фекальных Bifidobacterium spp.в исследовании кошек. У кошек с воспалительным заболеванием кишечника количество Bifidobacterium в кале меньше, чем у здоровых кошек (46). Следовательно, бифидобактерии могут быть полезны в создании противовоспалительной среды, а уменьшение количества бифидобактерий может быть вредным для кошек с риском первичного заболевания желудочно-кишечного тракта. Уменьшение фекальных бифидобактерий, связанное с введением омепразола, было временным, что позволяет предположить, что риск длительного приема омепразола, приводящего к изменению численности Bifidobacterium , вероятно, низок у здоровых кошек.Однако необходимы дополнительные исследования, оценивающие влияние длительного приема омепразола на численность Bifidobacterium у кошек с ВЗК и другими первичными заболеваниями желудочно-кишечного тракта.

Введение

омепразола увеличивало процент последовательностей Streptococcus, Lactobacillus, Clostridium и Faecalibacterium spp. и уменьшил таковой у Bifidobacterium spp. в кале всех кошек. Эти данные согласуются с данными, полученными у людей, собак и крыс, которым вводили ИПП.Однако из-за дизайна пилотного исследования и связанного с ним небольшого размера выборки статистическая значимость была потеряна после корректировки для множественных сравнений с учетом 50 статистических анализов, необходимых только на уровне рода. Следовательно, дальнейшая оценка, направленная на эти конкретные группы бактерий для ограничения эффекта множественных сравнений, показана для большой популяции кошек, особенно кошек с заболеванием ЖКТ, которым обычно назначают ИПП. Согласно расчету статистической мощности и размера выборки и при одинаковом процентном соотношении последовательностей, 45 кошек необходимо для достижения статистической значимости во всех бактериальных группах, для которых нескорректированное значение p было <0.05.

КПЦР фекалий C. perfringens, C. hiranonis, C. difficile и Bifidobacterium spp. не удалось выявить каких-либо существенных изменений у этих бактерий. Образцы фекалий являются наиболее сложными образцами для выделения и амплификации ДНК, поскольку они часто содержат ингибиторы ПЦР (51, 52). Однако, учитывая результаты секвенирования, результаты количественной ПЦР дополнительно подтверждают, что омепразол не вызывает значительных изменений в фекальном микробиоме здоровых кошек.

Одним из самых новых аспектов этого исследования является то, что оно также включало оценку метаболома, который еще предстоит тщательно изучить на людях, получавших ИПП.Всего в образцах фекалий кошек было идентифицировано 250 соединений с уникальными названиями и 428 соединений без названия; однако после внесения поправок на множественные сравнения ни одно из этих соединений не изменилось существенно при введении омепразола. До корректировки для множественных сравнений концентрация O, -ацетилсерина, аминомалоната и кетогексозы в кале снижалась при терапии омепразолом. O -ацетилсерин является центральным метаболитом ассимиляции серы, обеспечивающим углеродный каркас для синтеза цистеина (53).Считается, что некоторые усваивающие серу кишечные бактерии, такие как Salmonella typhimurium и Klebsiella aerogenes , используют O -ацетилсерин или родственные соединения для определения содержания серы в кишечной среде (54, 55). Учитывая их роль в ферментации, относительное количество различных кишечных бактерий также может влиять на концентрацию сахаров, таких как кетогексоза, выявленных в этом исследовании. По мере того, как мы начнем лучше понимать микробиом и его взаимодействие с метаболомом, влияние этих метаболитов на здоровье кишечника кошки будет лучше выяснено.

Для всех бактерий, кроме Streptococcus , нескорректированные значения p выявили разницу только на 30-й день, а процент последовательности приближается к исходному уровню через 60 дней. Это говорит о том, что если омепразол изменяет фекальный микробиом, изменения, вероятно, будут легкими и временными при введении здоровым кошкам в течение 60 дней или меньше. Этот вывод подтверждается тем фактом, что никаких значительных изменений в фекальном метаболоме не наблюдалось, что в значительной степени зависит от состава микробиоты желудочно-кишечного тракта хозяина.

В заключение, результаты этого пилотного исследования показывают, что пероральное введение омепразола (0,83–1,6 мг / кг) здоровым кошкам оказывает легкое влияние на микробиом и метаболом фекалий при приеме в течение 60 дней или меньше. Принимая во внимание, что популяция кошек, получающих омепразол, более вероятно, будет состоять из кошек с первичным заболеванием желудочно-кишечного тракта, а не здоровых людей, дальнейшее исследование оправдано на более крупной популяции кошек с заболеванием желудочно-кишечного тракта. Основываясь на результатах этого пилотного исследования, следует изучить действие омепразола на популяции не менее 45 кошек.Кроме того, с учетом изменений, наблюдаемых до корректировки для множественных сравнений, бактериальные группы, на которые следует обратить внимание, включают Streptococcus, Lactobacillus, Clostridium, Faecalibacterium и Bifidobacterium spp. Также необходима оценка фекальных метаболитов, таких как O, -ацетилсерин, аминомалонат и кетогексоза.

Заявление об этике

Это исследование было проведено в соответствии с рекомендациями Институционального комитета по уходу и использованию животных Университета Теннесси.Протокол был одобрен IACUC Университета Теннесси (32312-0115).

Взносы авторов

SS участвовал в разработке концепции и дизайне исследования, сборе образцов, статистическом анализе и интерпретации данных, а также в написании рукописи. MT участвовала в разработке концепции и дизайна исследования и сбора образцов, а также помогла составить черновик рукописи. JS участвовал в выделении ДНК, анализе микробиома и метаболома, а также в координации исследований и помогал составить рукопись.JP помогал в статистическом анализе и помогал составить рукопись.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют об отсутствии потенциальных конфликтов интересов в отношении исследования, авторства или публикации этой статьи. Авторы заявляют, что не используют противомикробные препараты не по назначению.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fvets.2018.00079/full#supplementary-material.

Сокращения

PPI, ингибитор протонной помпы; GI, желудочно-кишечный тракт.

Список литературы

1. Паркинсон С., Толберт К., Мессенджер К., Одунайо А., Брэнд М., Дэвидсон Г. и др. Оценка влияния перорально вводимых кислотоподавляющих веществ на внутрижелудочный pH у кошек. J Vet Intern Med (2014) 29: 104–12. DOI: 10.1111 / jvim.12493

CrossRef Полный текст | Google Scholar

2. Šutalo S, Ruetten M, Hartnack S, Reusch CE, Kook PH. Влияние перорального приема ранитидина и перорального приема один или два раза в день омепразола на внутрижелудочный pH у кошек. J Vet Intern Med (2015) 29: 840–6. DOI: 10.1111 / jvim.12580

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

3. Eom CS, Jeon CY, Lim JW, Cho EG, Park SM, Lee KS. Использование препаратов, подавляющих кислоту, и риск пневмонии: систематический обзор и метаанализ. Can Med Assoc J (2011) 183 (3): 310–19. DOI: 10.1503 / cmaj.092129

CrossRef Полный текст | Google Scholar

4. Лам Дж. Р., Шнайдер Дж. Л., Чжао В., Корли Д. А.. Использование ингибиторов протонной помпы и антагонистов рецепторов гистамина 2 и дефицит витамина B 12 . J Vet Med Assoc (2013) 310 (22): 2435–42. DOI: 10.1001 / jama.2013.280490

CrossRef Полный текст | Google Scholar

5. Ю. Э. У., Бауэр С. Р., Баин П. А., Бауэр Д. К.. Ингибиторы протонной помпы и риск переломов: метаанализ 11 международных исследований. Am J Med (2011) 124 (6): 519–26. DOI: 10.1016 / j.amjmed.2011.01.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

6. Джаннелла Р.А., Бройтман С.А., Замчек Н. Барьер желудочной кислоты для проглатываемых микроорганизмов у человека: исследования in vivo, и , in vitro, . Кишечник (1972) 13 (4): 251–6. DOI: 10.1136 / gut.13.4.251

CrossRef Полный текст | Google Scholar

7. Уильямс К., Макколл КЕЛ. Ингибиторы протонной помпы и избыточный бактериальный рост. Aliment Pharmacol Ther (2006) 24 (1): 3–10. DOI: 10.1111 / j.1365-2036.2006.02707.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

8. Барлетта Дж., Склар Д. Ингибиторы протонной помпы повышают риск внутрибольничной инфекции Clostridium difficile у тяжелобольных пациентов. Crit Care (2014) 18 (6): 714. DOI: 10.1186 / s13054-014-0714-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

9. Джанартанан С., Дитах И., Адлер Д.Г., Эринпрейс Миннесота. Clostridium difficile -ассоциированная диарея и терапия ингибиторами протонной помпы: метаанализ. Am J Gastroenterol (2012) 107 (7): 1001–10. DOI: 10.1038 / ajg.2012.179

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

10. Сето, Коннектикут, Джеральдо П., Оренштейн Р., Чиа Н., ДиБайз Дж.Продолжительное использование ингибитора протонной помпы снижает микробное разнообразие: последствия для восприимчивости Clostridium difficile . Микробиом (2014) 2 (1): 42. DOI: 10.1186 / 2049-2618-2-42

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

11. Lombardo L, Foti M, Ruggia O, Chiecchio A. Повышенная частота избыточного бактериального роста в тонком кишечнике во время терапии ингибиторами протонной помпы. Clin Gastroenterol Hepatol (2010) 8 (6): 504–8. DOI: 10.1016 / j.cgh.2009.12.022

CrossRef Полный текст | Google Scholar

12. Канно Т., Мацуки Т., Ока М., Уцуномия Х., Инада К., Магари Х. и др. Уменьшение желудочного сока приводит к изменению микрофлоры нижних отделов кишечника. Biochem Biophys Res Commun (2009) 381 (4): 666–70. DOI: 10.1016 / j.bbrc.2009.02.109

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

13. Гарсия-Мазкорро Дж. Ф., Суходольски Дж. С., Джонс К. Р., Кларк-Прайс С. К., Дауд С. Е., Минамото Ю. и др.Влияние ингибитора протонной помпы омепразола на бактериальную микробиоту желудочно-кишечного тракта здоровых собак. FEMS Microbiol Ecol (2012) 80 (3): 624–36. DOI: 10.1111 / j.1574-6941.2012.01331.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

14. Цуда А., Суда В., Морита Х., Таканаши К., Такаги А., Кога Ю. и др. Влияние ингибиторов протонной помпы на микробиоту просвета желудочно-кишечного тракта. Clin Transl Gastroenterol (2015) 6 (6): e89. DOI: 10.1038 / CTG.2015.20

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

15. Десаи А.Р., Мусил К.М., Карр А.П., Хилл Дж. Э. Характеристика и количественная оценка фекальной микробиоты кошек с использованием методов, основанных на последовательности cpn60, и исследование различий в структуре микробной популяции от животного к животному. Vet Microbiol (2009) 137 (1): 120–8. DOI: 10.1016 / j.vetmic.2008.12.019

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

16. Ричи Л. Е., Штайнер Дж. М., Суходольски Дж. С..Оценка микробного разнообразия кишечника кошек с использованием анализа гена 16S рРНК. FEMS Microbiol Ecol (2008) 66 (3): 590–8. DOI: 10.1111 / j.1574-6941.2008.00609.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

17. Ричи Л. Е., Берк К. Ф., Гарсия-Мазкорро Дж. Ф., Штайнер Дж. М., Суходольски Дж. С.. Характеристика фекальной микробиоты кошек с использованием универсального гена 16S рРНК и группоспецифичных праймеров для Lactobacillus и Bifidobacterium spp. Vet Microbiol (2010) 144 (1): 140–6. DOI: 10.1016 / j.vetmic.2009.12.045

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

18. Джонстон К., Лэмпорт А., Батт Р.М. Неожиданная бактериальная флора в проксимальном отделе тонкой кишки нормальных кошек. Vet Rec (1993) 132 (14): 362–3. DOI: 10.1136 / vr.132.14.362

CrossRef Полный текст | Google Scholar

19. Джонстон К.Л., Свифт Н.С., Форстер-ван Хейфте М., Рутгерз Х.С., Лампорт А., Баллевр О. и др.Сравнение бактериальной флоры двенадцатиперстной кишки у здоровых кошек и кошек с признаками заболевания желудочно-кишечного тракта. J Am Vet Med Assoc (2001) 218 ​​(1): 48–51. DOI: 10.2460 / javma.2001.218.48

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

20. Папасулиотис К., Спаркс А.Х., Верретт Дж., Иган К., Граффид-Джонс Е.А., Граффид-Джонс Т.Дж. Оценка бактериальной флоры проксимального отдела тонкой кишки у здоровых кошек и влияние метода отбора проб. Am J Vet Res (1998) 59 (1): 48–51.

PubMed Аннотация | Google Scholar

21. Брэдшоу Дж. У., Гудвин Д., Легран-Дефретен В., Нотт Х. М.. Выбор пищи домашней кошкой, облигатным хищником. Comp Biochem Physiol A Physiol (1996) 114 (3): 205–9. DOI: 10.1016 / 0300-9629 (95) 02133-7

CrossRef Полный текст | Google Scholar

23. Bajaj JS, Zadvornova Y, Heuman DM, Hafeezullah M, Hoffmann RG, Sanyal AJ, et al. Связь терапии ингибиторами протонной помпы со спонтанным бактериальным перитонитом у пациентов с циррозом печени и асцитом. Am J Gastroenterol (2009) 104 (5): 1130. DOI: 10.1038 / ajg.2009.80

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

24. Веспер Б.Дж., Джавди А., Альтман К.В., Хейнс II, Тао Л., Радосевич Я. Влияние ингибиторов протонной помпы на микробиоту человека. Curr Drug Metab (2009) 10 (1): 84–9. DOI: 10.2174 / 138920009787048392

CrossRef Полный текст | Google Scholar

25. Гулд Э., Клементс С., Рид А., Джори Л., Штайнер Дж. М., Лидбери Дж. А. и др.Перспективная плацебо-контролируемая пилотная оценка влияния омепразола на сывороточный кальций, магний, кобаламин, концентрацию гастрина и костную ткань у кошек. J Vet Intern Med (2016) 30 (3): 779–86. DOI: 10.1111 / jvim.13932

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

26. Макил О., Кальтенбах М.Л., Лимберг Дж., Харрисон Д., Хокинг М.П., ​​Дерендорф Х. Фармакокинетика ранитидина после частичной гастрэктомии у собак. J Pharm Sci (1991) 80 (11): 1034–6.

Google Scholar

27. Olson E, Honneffer J, Waddle M, Steiner J, Suchodolski J, Gaschen F. Оценка эффектов 2-недельного лечения метронидазолом на фекальный микробиом здоровых собак. J Vet Intern Med (2015) 29 (4): 1184–5.

Google Scholar

28. Кардона С., Эк А., Касселлас М., Галларт М., Аластру С., Доре Дж. И др. Условия хранения вещества кишечной микробиоты в метагеномном анализе. BMC Microbiol (2012) 12 (1): 158.DOI: 10.1186 / 1471-2180-12-158

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

29. Tal M, Verbrugghe A, Gomez DE, Chau C., Weese JS. Влияние хранения при температуре окружающей среды на фекальную микробиоту кошек. BMC Vet Res (2017) 13 (1): 256. DOI: 10.1186 / s12917-017-1188-z

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

30. Минамото Ю., Отони С.С., Стилман С.М., Бюйюклеблебичи О., Штайнер Дж. М., Джергенс А. Е. и др. Изменение фекальной микробиоты и профилей метаболитов в сыворотке крови у собак с идиопатическим воспалительным заболеванием кишечника. Кишечные микробы (2015) 6 (1): 33–47. DOI: 10.1080 / 194.2014.997612

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

31. Капорасо Дж. Г., Кучински Дж., Стомбо Дж., Биттингер К., Бушман Ф. Д., Костелло Е. К. и др. QIIME позволяет анализировать данные секвенирования сообщества с высокой пропускной способностью. Nat Methods (2010) 7 (5): 335–6. DOI: 10.1038 / nmeth.f.303

CrossRef Полный текст | Google Scholar

32. Эдгар Р.К., Хаас Б.Дж., Клементе Д.К., Айва К., Найт Р.UCHIME улучшает чувствительность и скорость обнаружения химер. Биоинформатика (2011) 27 (16): 2194–200. DOI: 10.1093 / биоинформатика / btr381

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

33. ДеСантис Т.З., Хугенхольц П., Ларсен Н., Рохас М., Броди Е.Л., Келлер К. и др. Greengenes, проверенная химерами база данных генов 16S рРНК и рабочая среда, совместимая с ARB. Appl Environ Microbiol (2006) 72 (7): 5069–72. DOI: 10.1128 / AEM.03006-05

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

34.Lozupone C, Knight R. UniFrac: новый филогенетический метод сравнения микробных сообществ. Appl Environ Microbiol (2005) 71 (12): 8228–35. DOI: 10.1128 / AEM.71.12.8228-8235.2005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

35. Китахара М., Сакамото М., Бенно Ю. Метод обнаружения Clostridium scindens и C. hiranonis в образцах фекалий человека методом ПЦР. Microbiol Immunol (2001) 45 (3): 263–6. DOI: 10.1111 / j.1348-0421.2001.tb02616.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

36. Suchodolski JS, Markel ME, Garcia-Mazcorro JF, Unterer S, Heilmann RM, Dowd SE, et al. Микробиом фекалий у собак с острой диареей и идиопатическим воспалительным заболеванием кишечника. PLoS One (2012) 7 (12): e51907. DOI: 10.1371 / journal.pone.0051907

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

37. Хоннеффер Дж. Б., Штайнер Дж. М., Лидбери Дж. А., Суходольски Дж. С.. Изменения микробиоты и метаболома в желудочно-кишечном тракте собак. Метаболомика (2017) 13 (3): 26. DOI: 10.1007 / s11306-017-1165-3

CrossRef Полный текст | Google Scholar

39. Шеннон К.Э., Уивер В., Блахут Р.Э., Хайек Б. Математическая теория коммуникации . Урбана, Иллинойс: Университет Иллинойса Press (1964).

Google Scholar

40. Квок С.С., Артур А.К., Анибуезе К.И., Сингх С., Каваллацци Р., Локи Ю.К. Риск заражения Clostridium difficile препаратами, подавляющими кислотность, и антибиотиками: метаанализ. Am J Gastroenterol (2012) 107 (7): 1011. DOI: 10.1038 / ajg.2012.108

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

41. Даниелл Х. Кислотоподавляющая терапия как фактор риска эзофагита Candida . Dis Esophagus (2015) 29 (5): 479–83. DOI: 10.1111 / dote.12354

CrossRef Полный текст | Google Scholar

43. Джонстон Дж., Неренберг К., Лоеб М. Мета-анализ: использование ингибиторов протонной помпы и риск внебольничной пневмонии. Aliment Pharmacol Ther (2010) 31 (11): 1165–77. DOI: 10.1111 / j.1365-2036.2010.04284.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

44. Ламберт А.А., Лам Дж. О., Пайк Дж. Дж., Угарте-Гил К., Драммонд МБ, Кроуэлл Т.А. Риск внебольничной пневмонии при амбулаторной терапии ингибиторами протонной помпы: систематический обзор и метаанализ. PLoS One (2015) 10 (6): e0128004. DOI: 10.1371 / journal.pone.0128004

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

46.Иннесс В.Л., Маккартни А.Л., Кху К., Гросс К.Л., Гибсон Г.Р. Молекулярная характеристика микрофлоры кишечника здоровых кошек с воспалительными заболеваниями кишечника с использованием флуоресцентной гибридизации in situ со специальной ссылкой на Desulfovibrio spp. J Anim Physiol Anim Nutr (2007) 91 (1–2): 48–53. DOI: 10.1111 / j.1439-0396.2006.00640.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

47. Suchodolski JS, Foster ML, Sohail MU, Leutenegger C, Queen EV, Steiner JM, et al.Микробиом кала у кошек с диареей. PLoS One (2015) 10 (5): e0127378. DOI: 10.1371 / journal.pone.0127378

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

48. Джексон М.А., Гудрич Дж. К., Максан М. Е., Фридберг Д. Е., Абрамс Дж. А., Пул А. С. и др. Ингибиторы протонной помпы изменяют состав микробиоты кишечника. Кишечник (2016) 65 (5): 749–56. DOI: 10.1136 / gutjnl-2015-310861

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

49.Китахара М., Такамине Ф., Имамура Т., Бенно Ю. Clostridium hiranonis sp. nov., кишечная бактерия человека с 7альфа-дегидроксилирующей активностью желчной кислоты. Int J Syst Evol Microbiol (2001) 51 (1): 39–44. DOI: 10.1099 / 00207713-51-1-39

CrossRef Полный текст | Google Scholar

50. Suchodolski JS, Xenoulis PG, Steiner JM. Распространенность Clostridium hiranonis в кишечном тракте здоровых собак и собак с желудочно-кишечными заболеваниями. Конгресс ECVIM-CA (2006 г.).

Google Scholar

51. Schrader C, Schielke A, Ellerbroek L, Johne R. Ингибиторы ПЦР – появление, свойства и удаление. J Appl Microbiol (2012) 113 (5): 1014–26. DOI: 10.1111 / j.1365-2672.2012.05384.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

52. Уилсон И. Ингибирование и облегчение амплификации нуклеиновых кислот. Appl Environ Microbiol (1997) 63 (10): 3741.

Google Scholar

53. Хефген Р., Никифорова В.Метаболомика, интегрированная с транскриптомикой: оценка реакции систем на стресс, вызванный дефицитом серы. Physiol Plant (2008) 132: 190–8. DOI: 10.1111 / j.1399-3054.2007.01012.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

54. Островски Дж., Кредич Н.М. In vitro взаимодействия белка CysB с промотором cysJIH Salmonella typhimurium: ингибирующие эффекты сульфида. J bacteriol (1990) 172 (2): 779–85.

Google Scholar

55.Линч А.С., Тиррелл Р., Смердон С.Дж., Бриггс Г.С., Уилкинсон А.Дж.. Характеристика белка CysB Klebsiella aerogenes : прямое доказательство того, что N-ацетилсерин, а не O-ацетилсерин, служит индуктором цистеинового регулона. Biochem J (1994) 299: 129–36. DOI: 10.1042 / bj29

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

#Pilot | Сэм и Кэт Вики

Эй, а ты Сэм из iCarly?
– Первая строчка сериала

#Pilot – это 1 серия st Sam & Cat . [4]

Сэм и Кэт встречаются на заднем сиденье движущегося мусоровоза. Они становятся соседями по комнате и решают открыть свою собственную услугу по присмотру за детьми. [5]

Участок

Вначале Сэм Пакетт едет по улице на мотоцикле. Она находится в Лос-Анджелесе и говорит, что «ищет развлечений» из-за переезда Карли в Италию. Несколько мгновений спустя Кэт Валентайн едет на велосипеде по улице и встречает двух детей, которые ищут котенка по имени «Посли». Она смотрит в мусорное ведро, падает и выскакивает с котенком, которого дети берут и уходят.Она роняет жевательную резинку в мусорное ведро и тянется назад, чтобы поднять ее, но проезжает мусоровоз и поднимает мусорное ведро, а Кэт все еще находится внутри, ища жевательную резинку. Сэм стоит рядом, ест буррито и видит, как Кэт выливается в мусоровоз. Она бросает буррито на улицу (немного грустно) и бежит за грузовиком, чтобы сказать водителю, что внутри девушка. Сэм забирается в мусоровоз, когда она не может привлечь внимание водителей и находит Кэт перевернутой внутри.Она вытаскивает голову Кота из мусора и ставит ее прямо, на что Кэт восклицает: «Вау! Это было так весело!» Сэм без энтузиазма соглашается. Кэт узнает Сэма из iCarly и, кажется, очень взволнован встречей с ней, но Сэм обеспокоен тем, что застрянет в грузовике, и говорит Кэт, что они должны выйти. В этот момент мусоровоз подбирает еще один мусорный бак и с громким шумом сбрасывает его в грузовик. Кэт нервно спрашивает, что это за шумы, и Сэм говорит, что это звук двух девочек, которые вот-вот будут раздавлены мусором.Верная своей безвкусной натуре, Кэт говорит: «Ты ведь не нас имеешь в виду?» Сэм пытается помочь Кэт выбраться из грузовика, но Кэт теряет сознание от страха. Сэм спасает потерявшего сознание Кота из грузовика.

Выйдя из грузовика, Сэм будит Кэт с помощью воздуходувки для листьев. Кэт спрашивает Сэма, где они и что за ужасный запах вокруг них. Сэм сообщает ей, что запах идет от них двоих, потому что они пошли «купаться в мусоре». Сэм говорит, что ей нужно найти место, где можно обмыться.Чтобы поблагодарить Сэма за ее помощь, Кэт предлагает позволить Сэму пойти с ней к ее Ноне в ванну. Эти двое притворяются дочерьми богатого британского врача, чтобы поехать на лимузине к Ноне. После душа Сэм встречает одного из соседей Кэт, Дайса, подростка, который торгует различными предметами, включая «прически знаменитостей». Когда Кэт сходит с ума от волос Джастина Бибера и покупает их, Дайс впервые замечает Сэма. Сэм предлагает продать часть ее волос, чтобы уравновесить стоимость покупки Кэт. Когда Дайс уходит, двое детей толкают в дом бабушку Кота, Нону.Она, няня на полставки, оплакивает свою неспособность справиться с такими сумасшедшими детьми и подумывает о переезде в дом престарелых. Кошка протестует, но присутствие Сэма отвлекает Нону от аргументов и соглашается позволить ей остаться на ночь.

Во время тяжелого ночного сна на диване-кровати Кэт, в котором Нона постоянно ходит во сне и укладывается на диван, Сэм признается Кэт, что она не торопится возвращаться в Сиэтл. Так как Карли находится в Италии, а ее мама «помешана на работе», она предпочитает путешествовать по Америке на своем мотоцикле и «посмотреть, куда она ее приведет.”Кэт пытается сказать Сэму, что это она сама может контролировать свое путешествие и пункт назначения, но формулирует это неправильно и сбивает Сэма с толку.

На следующее утро Нона просит Сэма отвести ее в Elderly Acres, и Сэм продолжает это делать. Кошка паникует и сразу же бежит к дому с двумя детьми и младенцем, за которым должна была ухаживать Нона. Она понимает, что Нона действительно хочет остаться, и просит ее приходить к ней как можно чаще. Тем временем Сэм заставляет троих детей покататься на ближайшем самокате, а также добровольно делает татуировку на месте запрошенного татуировщика, однако портит по крайней мере одну из просьб о татуировке, вытатуировав куриную ножку на руке одного человека.

Незаметно для нее дети едут в ресторан Inside Out Burger и заказывают там еду. У них возникают проблемы, когда они понимают, что у них нет денег, чтобы заплатить за это, и в конечном итоге их гоняет по парковке менеджер.

Сэм и Кэт возвращаются в квартиру. Кэт начинает думать, как хорошо было бы иметь отдельную квартиру, и Сэм говорит, что у нее есть опыт в этой области. Кэт смущена, говоря, что она думала, что Сэм жил с ее матерью. Сэм говорит, что жить с матерью очень похоже на жизнь в одиночестве.Дайс возвращается с ножницами и мешочками для волос Сэма. Они понимают, что детей с ними нет. Дайс упоминает, что только что видел их в Inside Out Burger. Они бросаются посмотреть, что за детьми гнался менеджер. Менеджер теряет сознание от истощения, вызванного погоней за детьми, а Сэм и Кэт работают вместе, чтобы оживить его, используя творческую форму сердечно-легочной реанимации. В качестве благодарности менеджер разрешает им получать бесплатные чизбургеры из ресторана на всю жизнь.

С безопасностью для детей и новой скидкой на гамбургеры они возвращаются в квартиру, где Кэт играет с детьми в видеоигры, а Дайс закупает у Сэма три мешка с волосами.Мать детей возвращается. В то время как дети открыто рассказывают ей все, Сэм и Кэт умудряются подвергать эти события цензуре, говоря, что все это часть видеоигры. Мать тут же платит Сэму 150 долларов и спрашивает, могут ли они снова присмотреть за ними. Сэм объясняет, что она там не живет, но Кэт соглашается.

Когда семья и Дайс уходят, Сэм в шутку заявляет, что она оставит себе большую часть денег, но вместо этого отдает их Кэт, чтобы поддержать ее, так как она какое-то время будет жить одна.Сэм собирается уйти, но Кэт говорит ей, что она думает, что им было весело вместе, и намекает на возможное будущее приключение между ними. Сэм говорит, что ей негде быть, а Кэт выглядит так, будто ей нужен сосед по комнате.

Кэт просит ее побыть с ней в Лос-Анджелесе некоторое время и помочь ей найти соседа по комнате, но Сэм показывает, что она уже нашла Кэт соседку по комнате: ее! Кот в восторге: «Это лучший день на свете!» Они завершают день на высокой ноте, едут на мотоцикле Сэма по пути в ресторан Inside Out Burger, где Кэт дразнит Сэма, и Сэм говорит: «Это будет долгая поездка.”

Цитаты

Работник грузовика с продуктами питания: Эй, а ты Сэм из iCarly ?

Сэм: Как ваши буррито на завтрак?

Работник фургона: Отвратительно.

Сэм: Что эта рыжая цыпочка делает в мусорном баке…и почему в моем буррито батарейка?

Кот: О, пожалуйста! Ты спас меня от мусора! Позвольте мне отплатить вам подарком купания.

Кот: Ой! Это что-то?

Сэм: Это я, Сэм! Выпусти меня с этого дивана!

Кат: На диване-кровати все не так!

Кошка: Я упаду в обморок, меня вырвет, я буду трахаться!

Старик: Я сказал вам, что хотел татуировку Авраама Линкольна!

Сэм: Ну и жаль! У тебя куриная ножка!

Сэм: У вас есть другой халат, который я мог бы надеть? Знаешь, тот, который не делает меня похожей на рвущую радугу?

Кат: Нет, но не волнуйтесь.Ваша одежда в сушилке.

Сэм: А когда они будут готовы?

Кат: Когда моя Нона приходит домой и показывает мне, как запустить сушилку.

Кот: Но я не могу жить здесь одна! Что, если я упаду в унитаз и снова застряну?

Нона: Я буду всего в пяти кварталах!

Cat: Пять блоков ?! Нона, это тоже – [начинает спорить с Ноной]

Сэм: Привет.Привет. Привет! Привет! Если она снова застрянет в туалете, не могли бы вы написать мне фото?

Кат: Она в гостях. Ничего страшного, если она останется здесь с нами сегодня вечером?

Нона: Эээ, конечно. Полагаю, у вас нет тюремного досье.

Сэм: Да, вы это предполагаете.

Сэм: Ага.Я еду туда, куда меня ведет мой мотоцикл.

Кат: Я думал, что человек управляет мотоциклом.

Сэм: Чувак, сколько Бибера ты понюхал ?!

Кот: [засовывает пальцы в уши Сэма]

Сэм: Убери пальцы из моих ушей.

Кот: [играет бонги на шлеме Сэма]

Сэм: Это будет долгая поездка.

Интересные факты

  • Название этой серии (#Pilot) следует тенденциям предыдущих шоу Шнайдера (то есть Victorious , iCarly и Drake & Josh) , который также содержал форму “Pilot” в названии премьеры.
  • Вместо #Pilot эпизод в Бельгии и Нидерландах называется #TheFirstEncounter.
  • Съемки этой серии начались 19 сентября и закончились 22 сентября 2012 года. [6] [7]
  • В этом эпизоде ​​у Сэма и Кэт такие же прически, что и на их оригинальных шоу. Также различаются комплекты Квартиры 22 и Престарелых Акров. Это показывает, что этот эпизод был снят раньше других.
  • Премьера этого эпизода состоялась в Национальный день лучших друзей 2013 года. [8]
  • Первые семь минут были выпущены на iTunes в качестве промо.
  • Два мальчика, которые ищут свою пропавшую кошку, Посли, на самом деле являются братьями Харрис в реальной жизни. [9]
  • Улица, где снимается первая сцена, – это то же место, где в Дрейк и Джош Джош пытался вести свою новую машину (с ручкой переключения передач) с Дрейком и Меган в «Мой ужин с Бобо», и где гигант Сцены кексов снимались в победоносном эпизоде ​​«Террор на Кекс-стрит».” [9]
  • В первом наброске пилотного сценария Сэм появилась в сцене, когда какие-то злые крутые девчонки пытались украсть у нее мотоцикл Кэт. Однако позже это было изменено с помощью спасательной машины для мусора. [9]
  • Пока Сэм и Кэт находятся в мусоровозе, мусор приближается (уплотняется) к девочкам. [9]
  • Мари настаивала на том, что она не использовала дублера для падения с тележки с продуктами на диван, и хотела сделать это сама. [9]
  • Кэт одела свое розовое платье задом наперед, потому что художник по костюмам подумал, что «так оно выглядело лучше». [9]
  • Когда Кот открывает крышку зеленого мусорного бака, Дэн Шнайдер не ожидал, что крышка упадет, но он делал это каждый раз. Он решил добавить строчку “О, петля!” чтобы Кот сказал, когда он упадет. [9]
  • Дженнет и Ариана действительно сильно ударились о дверь в сцене, когда они выбежали из квартиры.
  • У дивана было отверстие сзади, как показано в разделе «Как мы это сделали». [10]
  • Предположительно, это единственный раз, когда оригинальный дизайн квартиры Кэт (начиная с этого эпизода и далее она берет в субаренду у Ноны и делится с Сэмом). Начиная со следующего эпизода, он будет обновлен, чтобы продемонстрировать сущность Сэма и Кэт.
  • В финальных титрах показано повторение повторяющегося лунатизма Ноны и укладывания Сэма и Кэт на диван, на этот раз со смехом Кэт.
  • В отличие от большинства шоу, транслировавшихся о Нике, финальные титры показывались по телевидению аналогично тому, как iCarly делал в первом сезоне.
  • В этом эпизоде ​​впервые появляются Нона и Дайс, а также снова появляются Сэм и Кэт.
  • Это четвертый раз, когда персонажи из прошлого шоу Дэна Шнайдера возвращаются в другом шоу. Первым был эпизод iCarly «iStart a Fanwar», где Крэйг, Эрик и Гэвин из Drake & Josh , а также Стейси Диллсен из Zoey 101 играли второстепенные роли фанатов.Второй был в эпизоде ​​«iHire an Idiot», где Стейси появляется во второй раз для роли в одной сцене. Третий был в эпизоде ​​ Victorious “Helen Back Again”, где Хелен из Drake & Josh играет важную роль.
    • Однако это первый раз, когда у возвращающихся персонажей есть новое шоу, подразумевающее важное присутствие.
    • Это также первый раз, когда эти персонажи являются главными героями. Каждые Дрейка и Джоша и Зои 101 возвращенных персонажей были повторяющимися персонажами.
  • Мы едва можем видеть Тэнди во время перехода, и на его лице написано «DanWarp».
  • Этот эпизод конкурировал с премьерой на канале Disney Channel с фильмами «Удачи, Чарли», «Собака с блогом» и «Остин и Элли». Этот эпизод превзошел все шоу, набрав 4,1 просмотра.

Ссылки

  • Inside Out Burger – пародия на In-N-Out Burger. Он также упоминался в эпизоде ​​ Drake & Josh , «Водительские права», эпизоде ​​ iCarly, , iStart a Fan War и эпизоде ​​ Victorious , «Робарацци».”
  • Когда Сэм говорит в начале, мы видим DanWarp на заднем плане.

Раскрытие персонажей

  • Сэм, по-видимому, хороший татуировщик.

Лохи

  • Когда Нона запихнула Сэма и Кэт на диван-кровать, они могли умереть из-за нехватки кислорода. Однако в статье Secrets from Set на сайте Ника сзади было вырезано отверстие, чтобы их головы могли проскользнуть сквозь них.
  • Когда Кот включает свет, та же сцена, когда Нона складывает Сэма, лампа включается.Но когда Сэм использует лампу, чтобы выключить свет, все огни гаснут.
  • Кэт смеется после того, как Нона сказала, что она предположила, что у Сэма не было судимости, но Кэт должна знать, что у Сэма было судимость, потому что в эпизоде ​​ iCarly «iToe Fat Cakes» они говорят, что Сэм только что ушел через десять дней. без неприятностей, и что она не делала этого с четырех лет.
    • Несмотря на то, что Кэт знала о iCarly , она, вероятно, не была фанаткой того момента, чтобы смотреть все веб-трансляции.
  • В конце «iGoodbye» Сэм выезжает из Сиэтла без упаковки. Однако в начале этой серии она была одета в другую одежду.
    • Возможно, она купила новую одежду, когда ехала в Лос-Анджелес.
  • Сэм и Кэт видели друг друга в iParty With Victorious. По какой-то причине Кэт узнала Сэма из iCarly только в четвертый раз, когда они видятся друг с другом, то есть в начале. Кроме того, Сэм назвал ее «рыжеволосой цыпочкой», когда она впервые увидела ее, но она должна знать ее имя.Однако Сэм узнал ее имя после того, как Кэт сказала: «Заткнись, меня зовут Кэт!» когда она сталкивается с двумя мальчиками, ищущими своего кота.
    • Дэн Шнайдер объяснил, что причина в том, что он думал, что персонажи на самом деле не взаимодействовали во время этого эпизода, так что похоже, что они никогда раньше не встречались.
      • Однако говорят, что либо iParty с Victorious , либо Sam and Cat могут быть неканоничными, но пока ничего не подтверждено.
  • Неизвестно, как Сэм вернула свой мотоцикл, поскольку она ехала в лимузине по пути к квартире Кэт.

    Ошибка

  • Дайс не мог знать, что Сэм и Кэт присматривают за Максом и Хлоей, потому что они не сказали ему, плюс Нона собиралась присматривать за ними.
  • Когда они играли на Xbox, кабель для вывода на телевизор не был подключен.

Прижимные устройства

Непрерывность серии

  • Эпизод начинается с того, что Сэм едет на мотоцикле в Лос-Анджелес, продолжение того момента, когда она выезжает из Сиэтла на финал iCarly «iGoodbye».”
  • Чучело жирафа Кота, мистер Пурпур, из Victorious , вначале видно в ее корзине для велосипеда (и продолжает появляться на протяжении всего шоу).
  • Жизненная ситуация
  • Кэт с ее Ноной была задана сценаристами Победоносных в эпизоде ​​«Усеянная звездами Тори». [9]
  • Сэм вкратце упоминает, что Карли едет в Италию со своим отцом.
  • Кошка упала в обморок, когда испугалась, как в эпизоде ​​«Победа». «Худшая пара».
  • Нона спрашивает Сэма, есть ли у нее запись об аресте, и Сэм нерешительно отвечает.Это намек на то, что Сэма арестовывали несколько раз, о чем часто упоминалось в iCarly .
  • Сэм спрашивает Кэт, как прошла школа, а это значит, что Кэт все еще учится в средней школе искусств Голливуда.
  • И Сэм, и Кэт – продолженные персонажи из iCarly и Victorious соответственно.
  • Велосипед кошки был представлен в модели Victorious .
  • Появляется кошачий рюкзак от Victorious.
  • Интернет-шоу iCarly упоминалось несколько раз в первом эпизоде.
  • Нона упоминается в списке Победоносных .
  • Этот эпизод начинается с шутливых объятий Сэма и Кэт.
  • Несмотря на то, что это первый эпизод шоу, и Сэм и Кэт впервые присматривают за ним в сериале, это второй раз, когда Кэт присматривает за ним. Первый был, когда она держала Мэйбл и Уилсон для Трины в iParty с Victorious.
    • Оба раза она теряла детей.

Международные премьеры

  • 12 августа 2013 г. (Канада, YTV)
  • 7 сентября 2013 г. (Канада, Nickelodeon)
  • 28 сентября 2013 г. (Германия, Нидерланды, Польша)
  • 29 сентября 2013 (Скандинавия)
  • 11 октября 2013 г. (Австралия и Новая Зеландия, Юго-Восточная Азия)
  • 14 октября 2013 г. (Великобритания и Ирландия)
  • 19 октября 2013 г. (Латинская Америка)
  • 30 октября 2013 (Франция)
  • 4 ноября 2013 г. (Италия, Португалия, Испания)
  • 11 ноября 2013 (Турция)
  • 31 декабря 2013 г. (Квебек)
  • 16 февраля 2014 (Венгрия)
  • 24 февраля 2014 (Греция)
  • 2 апреля 2014 г. (Япония)

Приемная

Премьера серии 4.156 миллионов зрителей. Благодаря этому, он стал первой программой Nickelodeon по сценарию, которая преодолела 4-миллионный барьер в 2013 году. [3] Утром 9 июня 2013 года она также заняла первое место в iTunes. [11]

Джо из Hit Zone дал хороший обзор премьерному эпизоду, сказав: «Дэн Шнайдер всегда приносит смешное, и похоже, что у него есть еще один хит с Сэмом и Кэт». [12]

Список литературы

[# пилотных кредитов]

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Back To Top